CPP 是一種巴甫洛夫條件反射形式，用于研究與濫用**相關(guān)的獎勵效應(yīng)。
成年斑馬魚習(xí)慣于將**暴露與特定（中性）環(huán)境刺激聯(lián)系起來。該實驗的目的是測量在特定環(huán)境中花費的時間，該環(huán)境以前與某種物質(zhì)（**）相關(guān)，表明該化合物具有積極的增強特性。
實驗裝置
CPP 實驗裝置。A) 顯示了用于創(chuàng)建 4 個獨立隔間的分隔插入。B) 在實驗運行期間從 分析軟件界面捕獲的靜止圖像。如白色十字所示，在單獨的競技場中追蹤了四條魚。由于紅外跟蹤，實時跟蹤圖像上看不到刺激，因此在圖像上用彩色框表示刺激。
FishTrack軟件用于分析斑馬魚的 CPP實驗。分隔插件用于創(chuàng)建四個獨立的測試隔間，用于在一個單元中跟蹤四條魚（見上圖 A）。刺激從測試箱下方的集成屏幕呈現(xiàn)。刺激可以由顏色、形狀或條紋組成，并且在呈現(xiàn)時可以選擇是否有偏見（見圖 B）。
實驗程序
CPP 范式在連續(xù)幾天發(fā)生的三個測試階段中進行。
-
重要的單一飼養(yǎng)：為了減少任何壓力影響，待測試的魚應(yīng)在習(xí)慣化階段之前單獨飼養(yǎng)一周。
-
習(xí)慣化/自動塑造：在記錄 CPP 前兩天，還應(yīng)將個別魚輕輕網(wǎng)住并放入 水箱中，讓其自由游泳 10-20 分鐘。這一步可以讓魚適應(yīng)新的測試環(huán)境。
-
基線：在**個測試階段，記錄兩個不同環(huán)境的基線偏好。將魚放入單獨的測試缸中 20 分鐘，在此期間，允許每條魚探索其完整的測試場地，同時顯示兩種刺激。FishTrack系統(tǒng)可以自動跟蹤和測量在兩種刺激環(huán)境中花費的時間和行駛距離，以計算基線偏好。
-
計算百分比和基線刺激偏好。在基線的每個刺激附近花費的時間比例計算為：刺激 A 中的時間/（刺激 A 中的時間 + 刺激 B 中的時間）。
-
調(diào)節(jié)：在建立基線偏好后，連續(xù)三天，在存在*不喜歡的刺激（魚在基線期間花費*少時間的刺激）的情況下，將魚暴露于測試化合物或?qū)φ仗幚?。魚被單獨放入水缸，優(yōu)選刺激（魚在基線期間花費*多時間的刺激）預(yù)計 20 分鐘。然后將刺激改為*不喜歡的刺激，持續(xù) 20 分鐘，然后將測試化合物或鹽水注入罐中。
-
魚被放回原缸，測試缸被沖洗干凈。
-
探測：在 3 天的調(diào)節(jié)后，使用探測試驗確定偏好的任何變化。此步驟與基線記錄相同。將魚放入測試罐中 20 分鐘。兩種刺激同時呈現(xiàn)，魚在競技場中自由活動。測量在任一刺激環(huán)境中行進的時間和距離。
-
計算百分比和探測刺激偏好。位置偏好變化（CPP 變化評分）的計算方法是，從調(diào)節(jié)后**配對環(huán)境中的時間百分比中減去調(diào)節(jié)前**配對環(huán)境中花費的時間百分比，并以百分比表示。
-
在此任務(wù)中通常測量的行為端點是在每個刺激附近花費的時間和行進的距離。FishTrack系統(tǒng)可以自動測量和處理這些行為端點。
-
處理后的數(shù)據(jù)文件以 .csv 文件的形式編寫，例如 Excel進行訪問。CPP 協(xié)議中使用的典型變量包括行駛距離、每個變量花費的時間、計數(shù)器和總行駛距離。
-
相對于對照，在**配對環(huán)境中花費的時間增加被視為測試化合物有回報的證據(jù)（計算為 CPP 變化分數(shù)）。環(huán)境刺激和測試化合物之間的學(xué)習(xí)關(guān)聯(lián)導(dǎo)致魚在該環(huán)境刺激中花費更多時間。
-
CPP 變化評分經(jīng)常通過比較**條件劑量的單向 ANOVA 進行分析（參見圖像 D 和 E）。
文獻參考
Mathur, P., Lau, B., & Guo, S. (2011). Conditioned place preference behavior in zebrafish. Nature Protocols, 6(3), 338-345.
Ninkovic, J., & Bally-Cuif, L. (2006). The zebrafish as a model system for assessing the reinforcing properties of drugs of abuse. Methods, 39(3), 262-274.
Tzschentke, T. M.(2007). Measuring reward with the conditioned place preference (CPP) paradigm: update of the last decade. Addict Biol, 12(3-4), 227-462. Doi: 10.1111/j.1369-1600.2007.00070.x
